Реакция выявления вирусных антигенов
Реакция выявления вирусных антигенов, реакция нейтрализации (РН) — идентификация вирусных антигенов, осуществляемая с помощью реакции нейтрализации в чувствительных к вирусу живых системах (культура клеток, лабораторные животные, куриные эмбрионы). РН позволяет определить видовую и типовую (вариантную) принадлежность вируса. Вирусные антигены в организме могут направленно и специфически изменять биосинтез его белков таким образом, что часть вновь образующихся молекул белка приобретает способность реагировать с поступившим вирусным антигеном.
В процессе репродукции вируса в клетке происходит синтез ви-русоспецифических неструктурных белков, которые также обладают антигенными свойствами. Для проведения РН из материала, содержащего вирус, готовят серийные разведения и добавляют к ним определённую сыворотку, разведённую в соответствии с титром, указанным на этикетке ампулы. Смесь выдерживают 30-60 мин при температуре 37°С, после чего ею заражают культуры ткани или лабораторных животных. Контролем служит чувствительная система, заражённая вирусом, обработанным нормальной сывороткой. РН считают положительной при отсутствии цитопато-генного действия (ЦПД) в культуре ткани, отсутствии изменений в куриных эмбрионах или гибели животных. На основании результатов РН определяют индекс нейтрализации — отношение титра вируса (при наличии ЦПД) в контроле к титру вируса в опыте. Если индекс нейтрализации менее 10, реакция отрицательная, от 11 до 49 — сомнительная, от 50 и выше — положительная (достоверное соответствие вируса антисыворотке). Наиболее чувствительным вариантом РН является реакция редукции вирусных бляшек — подавление вирусного бляшкообразования под действием вирусоспецифической антисыворотки.